数字货币合约交易所

技术文章

生化实验室15大常识


深圳数字货币合约交易所科技有限公司销(xiao)售多款实验室仪器设备,ccjunzheng.com 服(fu)务(wu)电话:4000300048


生化实(shi)验室15大(da)常识


标签 离(li)心机(ji) 移液器 ** cc 克隆载(zai)体(ti) 


[导读] 生化(hua)实验(yan)室15大常识。


  1.在重蒸酚中(zhong)为什么(me)加(jia)入(ru)0.1%的8-羟(qiang)基(ji)(ji)喹啉及(ji)少量巯基(ji)(ji)乙醇?


  保存在(zai)冰箱中(zhong)的(de)酚(fen),容(rong)易被空气氧化而变(bian)成粉红色,这(zhei)样的(de)酚(fen)容(rong)易降解DNA,一(yi)(yi)般不可以使用。为了防止酚(fen)的(de)氧化,可加入(ru)0.1%的(de)8-羟基(ji)喹啉(lin)及少量巯基(ji)乙(yi)醇。8-羟基(ji)喹啉(lin)是带有淡黄色的(de)固体粉沫,不仅能(neng)抗(kang)氧化,并在(zai)一(yi)(yi)定程度上(shang)能(neng)抑(yi)制DNase的(de)活(huo)性(xing)。


  2.如何将不(bu)同构(gou)型的质粒DNA区别开?


  由于不同(tong)构(gou)型的(de)DNA在琼脂糖凝胶电泳中的(de)迁移率不同(tong),cccDNA的(de)泳动速(su)度(du)*快,通(tong)过凝胶电泳方法可将(jiang)不同(tong)构(gou)型的(de)DNA区别(bie)开。


  3.用酚(fen)-氯仿抽提(ti)细胞基(ji)因组DNA时,通常(chang)要在酚(fen)-氯仿中(zhong)加(jia)少许异戊醇,为什么?


  异戊醇可以降低表面张力,从而减少(shao)气泡产生。另外(wai),异戊醇有(you)助于分相(xiang)(xiang),使离(li)心(xin)后的上层(ceng)含(han)DNA的水(shui)相(xiang)(xiang)、中间的变性(xing)蛋白相(xiang)(xiang)及(ji)下层(ceng)有(you)机溶剂相(xiang)(xiang)维持(chi)稳定。


  4.用乙醇(chun)沉(chen)淀DNA时(shi),为(wei)什么加(jia)入单价的阳(yang)离子?


  用乙醇(chun)沉淀(dian)DNA时,通常要在溶液中加(jia)入单(dan)价(jia)的(de)阳离子(zi),如NaCl或NaAc,Na+中和DNA分(fen)子(zi)上的(de)负电荷(he)(he),减(jian)少DNA分(fen)子(zi)之(zhi)间(jian)的(de)同性电荷(he)(he)相斥(chi)力,而易于聚集沉淀(dian)。


  5.在提(ti)取RNA时经常(chang)使用异(yi)硫氰酸胍,有什么(me)作(zuo)用?


  RNA是(shi)一(yi)种极易降解的(de)核酸分子。高(gao)浓度强(qiang)变性剂异硫氰(qing)酸胍使细(xi)(xi)胞(bao)结构迅速被破坏,使RNA从细(xi)(xi)胞(bao)中(zhong)释(shi)放出来。同时(shi)高(gao)浓度异硫氰(qing)酸胍还使细(xi)(xi)胞(bao)内的(de)RNA酶失活,使释(shi)放出的(de)RNA不被降解。


  6.蛋白印(yin)迹中封(feng)闭液的作用?


  封(feng)闭(bi)液的(de)作用(yong)(yong)是封(feng)闭(bi)未吸附蛋白(bai)的(de)部位(wei),以减少非特异性结合背(bei)景的(de)影响。常用(yong)(yong)的(de)封(feng)闭(bi)液有(you)脱脂(zhi)奶(nai)粉、小牛(niu)血(xue)清(qing)等。


  7.DNA通常保存在什么缓冲(chong)液中?


  采用TE缓(huan)(huan)冲液,Tris-HCl的(de)(de)缓(huan)(huan)冲系统,加(jia)入EDTA可以螯合二价金属(shu)离子进而抑(yi)制依赖于二价金属(shu)离子的(de)(de)DNA酶的(de)(de)活性,对(dui)DNA起到保护作用。


  8.在(zai)酶切反(fan)应缓冲(chong)液中为什么加(jia)入BSA?


  通过提(ti)高溶(rong)液中蛋白质的浓度,对(dui)酶(mei)起保(bao)护作用。


  9.简单的克(ke)隆载体必需包括什么?


  复(fu)制起(qi)点(dian);选择标记:主要(yao)是抗性基因(yin);多克隆位点(dian):便于外源DNA的插入。


  10.用(yong)酚抽提细胞DNA时,有什么作用(yong)?


  使蛋白质变性。


  11.在分离DNA时,要使用EDTA,为什么?


  EDTA是金属离子(zi)螯合剂,螯合二价离子(zi),抑制核酸酶的活(huo)性(xing)。


  12.在分离DNA过程(cheng)中,造(zao)成DNA分子(zi)断裂(lie)的因(yin)素有哪(na)些(xie)?


  核(he)酸酶(mei)降解;化学(xue)降解;物(wu)理剪切(qie)。


  13.使(shi)用离心机应注意什(shen)么?


  首(shou)先(xian)应(ying)该(gai)根据自己(ji)的(de)实验需(xu)求选择合适的(de)离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)机(ji)和转子(zi)(zi)以及离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)管,使用离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)机(ji)时(shi)的(de)工作转速(su)不应(ying)该(gai)超(chao)过离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)机(ji)、转子(zi)(zi)以及离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)管的(de)*大允许转速(su)。离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)前(qian)注意(yi)严(yan)格平(ping)衡样品。安(an)装转子(zi)(zi)和转子(zi)(zi)盖要规范、准确(que)。离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)时(shi)要留人看(kan)守,发现离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)机(ji)异(yi)常(chang)应(ying)立即关闭离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)机(ji)。离(li)(li)(li)(li)心(xin)(xin)结束后要安(an)放(fang)好转子(zi)(zi)。


  14.分(fen)子生物学实验室常用的**方(fang)法有哪些?


  高压(ya)蒸汽**、干(gan)热**、化(hua)学药剂**、过滤(lv)**。


  15.使用移液器有(you)哪些注(zhu)意事项?


  垂直吸液(ye)、慢(man)吸慢(man)放;选择合适(shi)的(de)量程范围,不(bu)能超过(guo)量程使(shi)用(yong);选择与移液(ye)器匹配的(de)枪头,安装(zhuang)枪头时不(bu)要用(yong)力太猛(meng);移液(ye)器每(mei)日(ri)用(yong)完后,应旋到*大刻度。


产品目录
联系数字货币合约交易所
数字货币合约交易所
技术文章
Copyright© 2003-2021  深圳数字货币合约交易所科技有限公司版权所有     

电话:0755-25928978 89512173 传真(zhen):0755-89512173     地址:深圳市福田区八卦三路荣生大厦402室